寡核苷酸（oligonucleotides）是由少数核苷酸单元组成的短链核酸分子，广泛应用于分子诊断、靶向治疗、RNA干扰、抗病毒和基因编辑等领域。当前主流的合成技术是固相磷酰胺化学法（solid-phase phosphoramidite synthesis），具有合成效率高、自动化程度高、序列控制精确等特点。

合成核心步骤与关键底物

寡核苷酸的固相合成一般包括以下循环步骤：

脱保护（Deprotection）：去除5'-端的DMT保护基；

碱基偶联（Coupling）：将一个新的磷酰胺单体接入链末端；

氧化/硫化（Oxidation/Sulfurization）：将中间产物稳定化；

封端（Capping）：终止未反应的羟基，防止杂质链延长。

其中所用的关键底物包括：

核苷磷酰胺单体（Nucleoside Phosphoramidites）：作为每一碱基延长的核心原料，其结构准确性与纯度决定了合成效率和最终产物质量；

Unylinker 固相载体：一种可高效裂解、残基最少的支撑材料，广泛替代传统 CPG，提升收率并减少杂质形成；

保护基核苷（如DMT保护）：保证反应方向性与序列准确；

反应辅助试剂（硫化剂、氧化剂、封端剂等）：确保链的完整性与反应效率。

下游修饰——GalNAc 的重要性

在核酸药物领域，GalNAc（三聚半乳糖胺）修饰是一种重要的靶向递送技术，能够实现寡核苷酸分子特异性地进入肝细胞，显著提高体内利用度与治疗靶向性。GalNAc通常通过共价方式修饰在寡核苷酸的末端或侧链结构上，在siRNA与ASO药物中应用广泛，如FDA批准的Givosiran、Lumasiran等。