一代测序
一代测序又称Sanger测序，由Frederick Sanger于1977年发明，是最早的基因测序技术，被称为基因检测的金标准。Sanger测序的原理是将双脱氧核苷酸(ddNTP)参入到新合成的DNA链中，由于参入的ddNTP缺乏3’-羟基，因此不能与下一位核苷酸反应形成磷酸二酯键，DNA合成反应将终止。Sanger法测序由一套四个单独的反应构成，每个反应系统包含四种脱氧核苷三磷酸dNTP，可以正常合成DNA。每个反应系统加入四种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)，ddNTP随机取代相应的dNTP，由于ddNTP缺乏延伸所需要的3’-0H基团不能继续延伸,使延伸的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止。终止的核苷酸由相应的ddNTP决定，为了方便定位，一般选用荧光或者同位素将其标记，通过电泳可分离出长度不同的片段，再对这些片段的末端碱基进行检测从而获得所测片段的碱基序列。
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