实时荧光定量PCR
实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR，简称qPCR）是一种在PCR反应体系中加入荧光物质，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
实时荧光定量PCR反应中所使用的荧光物质可分为荧光探针和荧光染料两种：
1. 荧光探针：该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。在PCR反应体系中加入特异性的荧光探针，当探针完整时，报告基团发射的荧光信号会被淬灭基团吸收，荧光检测系统无法接收荧光信号；在PCR扩增时，Taq酶的5'－3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
2. 荧光染料：在PCR反应体系中加入SYBR荧光染料，SYBR荧光染料可以非特异性地掺入DNA双链，从而发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，以此来保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合，因此可以通过溶解曲线，确定PCR反应是否特异。
实时荧光定量 PCR技术可以应用在多个领域，包括：病原微生物检测、肿瘤早筛、肿瘤检测、基因变异分析、NIPT、遗传病筛查等。
相关产品推荐
奥利芙生物重磅推出分子生物学级高质量产品，欢迎订购！
关注我们
